目的  探讨子宫内膜异位症患者哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达。方法 选取2019年8月至2022年1月在新疆医科大学第五附属医院诊治的子宫内膜异位症患者72例作为子宫内膜异位症组，选取同期进行妇科手术得到正常子宫内膜病理组织患者72例作为对照组。取2组患者的子宫内膜上皮组织，采用免疫组织化学法检测mTOR信号通路相关蛋白表达水平。比较2组子宫内膜上皮组织磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)蛋白、蛋白激酶B（Akt）蛋白、mTOR表达阳性率并分析其与子宫内膜异位症发生的相关性。结果 子宫内膜异位症组患者子宫内膜上皮组织中PI3K蛋白、Akt蛋白、mTOR表达阳性率均高于对照组［76.4%(55/72)比18.1%(13/72)、72.2%(52/72)比20.8%(15/72)、70.8%(51/72)比22.2%(16/72)］(均P＜0.001)。144例患者中，子宫内膜上皮组织PI3K蛋白、Akt蛋白、mTOR表达阳性率与子宫内膜异位症的发生均呈正相关(r=0.633、P＜0.001；r=0.597、P=0.003；r=0.601、P＜0.001)。结论 子宫内膜异位症患者的子宫内膜上皮组织mTOR信号通路相关蛋白呈现高表达，PI3K蛋白、Akt蛋白、mTOR表达阳性率与子宫内膜异位症的发生均呈正相关。

目的 探讨血浆转化生长因子β1(TGF-β1)水平在预测肺癌患者放疗后近期疗效中的作用及相关机制。方法 选取2016年6月至2017年6月在甘肃省庆阳市人民医院接受胸部调强放疗的肺癌患者78例。分别于放疗前、放疗2周和4周、放疗结束后6周采集血液标本检测血浆TGF-β1和外周血淋巴细胞亚群水平以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达情况。分析放疗前后血浆TGF-β1水平与疗效的关系；分析放疗期间血浆TGF-β1与外周血淋巴细胞亚群水平的相关性。结果 放疗2、4周和放疗结束后6周，治疗有效者TGF-β1水平均明显低于治疗无效者（均P＜0.05）。放疗2、4周和放疗结束后6周患者血浆TGF-β1水平与同时点CD+4细胞和CD+4/CD+8比值均呈明显负相关，与CD+8细胞均呈明显正相关（均P＜0.01）。放疗4周和放疗结束后6周磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白相对表达量分别为（3.25±0.72）、（1.76±0.54），磷酸化Akt（p-Akt）蛋白相对表达量分别为（1.95±0.64）、（1.02±0.38），均明显低于放疗前和放疗2周［p-mTOR：（5.91±1.15）、（6.14±1.80），p-Akt：（8.36±1.47）、（7.51±1.13）］（均P＜0.05）。结论 肺癌患者放疗后TGF-β1水平降低者近期疗效较好；其机制可能为TGF-β1水平降低通过提升T淋巴细胞水平来抑制Akt/mTOR磷酸化，降低PI3K-Akt-mTOR信号通路活性，增强机体抗肿瘤免疫反应。

目的 探讨松果菊苷对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其可能机制。方法 以卵巢浆液性癌细胞株SKOV3为研究对象，细胞计数盒8法检测不同浓度松果菊苷（0、6.25、12.5、25、50、100、200、400 μmol/L）对细胞活力的影响；将SKOV3细胞完全随机分为对照组、松果菊苷低剂量（25 μmol/L）组、松果菊苷中剂量（50 μmol/L）组、松果菊苷高剂量（100 μmol/L）组和松果菊苷高剂量+740Y-P［磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）激动剂，100 μmol/L］组。采用集落形成实验、TUNEL染色和Transwell实验检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力；成管试验检测血管生成；蛋白质印迹法检测增殖、凋亡、侵袭、血管生成和PI3K/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关蛋白表达。结果 细胞计数盒8法检测结果发现，随着松果菊苷浓度的增加，SKOV3细胞的存活率逐渐降低，分别为（100.0±5.5）%、（98.3±3.3）%、（93.3±3.4）%、（58.3±3.8）%、（42.4±4.6）%、（28.8±2.2）%、（19.4±3.4）%、（6.4±1.5）%，呈浓度依赖性（P<0.05）。与对照组比较，松果菊苷低、中和高剂量组SKOV3细胞的集落形成数、迁移和侵袭细胞数、相对环形管状结构形成比、细胞增殖抗原Ki-67、B淋巴细胞瘤基因2（Bcl-2）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和血管内皮生长因子A（VEGFA）表达，磷酸化（p）-PI3K/PI3K、p-AKT（S473）/AKT、p-AKT（T308）/AKT和p-mTOR/mTOR比值均逐渐减少/降低，凋亡率和活化半胱氨酸蛋白酶3（Cleaved caspase 3）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达逐渐升高，呈浓度依赖性，差异均有统计学意义（均P<0.05）。与松果菊苷高剂量组比较，松果菊苷高剂量+740Y-P组SKOV3细胞的集落形成数、迁移和侵袭细胞数、相对环形管状结构形成比，Ki-67、Bcl-2、N-cadherin和VEGFA表达，p-PI3K/PI3K、p-AKT（S473）/AKT、p-AKT（T308）/AKT和p-mTOR/mTOR比值均增多/升高，凋亡率和Cleaved caspase 3、Bax、E-cadherin表达均降低，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 松果菊苷可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成，其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

目的 研究替米沙坦对硬化性胃癌（SGC）细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法 常规培养胃癌细胞MKN1和SGC细胞HSC45。采用细胞计数盒8实验检测替米沙坦对MKN1和HSC45增殖能力的影响；流式细胞仪检测替米沙坦对HSC45凋亡和细胞周期的影响；蛋白质印迹法检测激活替米沙坦对HSC45自噬和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白表达的影响；采用PI3K/AKT/mTOR信号通路激活剂SC79和替米沙坦共同处理HSC45，分别检测激活PI3K/AKT/mTOR信号通路后，替米沙坦对HSC45增殖、凋亡、自噬和细胞周期的影响。结果 替米沙坦呈浓度和时间依赖性抑制MKN1和HSC45细胞增殖（均P＜0.001），且对HSC45细胞增殖抑制效果更为显著（P＜0.05）。替米沙坦组HSC45早期凋亡率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量、G0/G1期细胞周期比例均高于对照组［（26.2±2.6）%比（1.3±0.4）%、（1.02±0.09）比（0.29±0.04）、（53.4±3.4）%比（38.1±2.9）%］，磷酸化PI3K、磷酸化AKT和磷酸化mTOR蛋白表达均低于对照组（均P＜0.05）。替米沙坦组和替米沙坦+SC79组HSC45细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达及G0/G1期细胞比例均高于对照组，但替米沙坦+SC79组均低于替米沙坦组（均P＜0.05）。结论 替米沙坦下调PI3K/AKT/mTOR信号通路，促进SGC细胞凋亡、自噬和周期阻滞，进而抑制SGC细胞增殖能力。

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。方法 将A549细胞（腺癌人类肺泡基底上皮细胞）一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组。支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组高氧环境培养，置于37 ℃、85%氧气孵化箱中培养48 h，前者不加药剂、后者加10 μmol/L的雷帕霉素干预；对照组常规环境培养，置于37 ℃、5%二氧化碳孵化箱中培养48 h，不加药剂。利用高氧构建支气管肺发育不良的细胞模型，利用蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）实验验证自噬对高氧处理后A549细胞肺泡表面标志物合成蛋白复合物（SPC）、水通道蛋白5（AQP5）的影响，利用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）实验检测自噬对高氧处理后A549细胞增殖的影响，利用蛋白质印迹实验验证PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。结果 蛋白质印迹实验和RT-qPCR实验表明自噬激活剂雷帕霉素挽救了高氧处理后A549细胞SPC、AQP5表达的下调。EdU实验表明雷帕霉素显著促进了高氧处理后A549细胞的增殖，EdU阳性细胞百分比高于支气管肺发育不良组［（0.48±0.06）比（0.36±0.02）］(P＜0.05)。蛋白质印迹实验显示雷帕霉素干预后的A549细胞中的磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt、磷酸化-mTOR、自噬选择性底物P62的表达水平显著降低，微管相关蛋白1轻链3的表达水平显著上升(均P＜0.05)。结论 PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中发挥着重要作用。

目的  探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLGAP1-AS2在肾透明细胞癌（ccRCC）中的作用及分子机制，以及DLGAP1-AS2表达在ccRCC患者中的预后价值。方法  首先分别在人肾小管上皮细胞系HK-2和人ccRCC细胞系786-O中检测DLGAP1-AS2的表达水平，随后，通过细胞转染技术将过表达DLGAP1-AS2（Ov-DLGAP1-AS2）和过表达对照物（Ov-NC）转染到人ccRCC细胞系786-O细胞中，并检测细胞增殖活性和免疫逃逸能力的变化。检测Ov-DLGAP1-AS2对786-O细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路成员表达的影响。使用PI3K/Akt/mTOR通路激动剂740Y-P刺激786-O细胞，进一步探讨DLGAP1-AS2的作用机制。最后，在ccRCC患者中进行生存分析，并构建基于DLGAP1-AS2的ccRCC患者预后判断列线图。结果  786-O细胞中DLGAP1-AS2表达水平低于HK-2细胞［（0.50±0.08）比（0.95±0.05）］（P=0.002）。接种细胞48、72 h后，Ov-DLGAP1-AS2组细胞增殖活性低于Ov-NC组和对照组（均P＜0.05）。Ov-DLGAP1-AS2组细胞上清液中可溶性人程序性死亡配体1（sPD-L1）浓度低于Ov-NC组和对照组（均P＜0.05），将786-O细胞与T细胞共培养后，Ov-DLGAP1-AS2/T组细胞上清液中γ干扰素、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素2（IL-2）浓度高于Ov-NC/T组和T细胞组（均P＜0.05）。Ov-DLGAP1-AS2组中PI3K、Akt和mTOR的表达水平低于Ov-NC组和对照组（均P＜0.05）。加入740Y-P刺激786-O细胞，接种细胞48、72 h后，Ov-DLGAP1-AS2+740Y-P组细胞增殖活性高于Ov-DLGAP1-AS2组（均P＜0.05），且Ov-DLGAP1-AS2+740Y-P组细胞上清液中sPD-L1的浓度高于Ov-DLGAP1-AS2组，与T细胞共培养后，Ov-DLGAP1-AS2/T+740Y-P组细胞上清液中γ干扰素、TNF-α、IL-2浓度低于Ov-DLGAP1-AS2/T组（均P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线表明DLGAP1-AS2高表达患者预后差于DLGAP1-AS2低表达患者（Log-rank P＜0.001），且DLGAP1-AS2高表达为ccRCC患者预后的独立危险因素（均P＜0.05）。基于DLGAP1-AS2构建了列线图，经验证可以较好地预测ccRCC患者生存率。结论  过表达DLGAP1-AS2能够通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路，抑制786-O细胞的增殖活性和免疫逃逸。DLGAP1-AS2高表达预示ccRCC患者预后不良。DLGAP1-AS2是ccRCC潜在的治疗靶点和预后标志物。

目的 探讨解毒祛瘀方通过抑制磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的逆转作用及机制。方法采用低浓度逐步加量诱导法建立乳腺癌他莫昔芬耐药细胞株MCF-7C，并分为空白对照组、解毒祛瘀方（2.5 g/L）组、他莫昔芬（10 μmol/L）组、他莫昔芬（10 μmol/L）+解毒祛瘀方（2.5 g/L）组、胰岛素样生长因子1（IGF-1）（10 μg/L）+他莫昔芬（10 μmol/L）+解毒祛瘀方（2.5 g/L）组。采用噻唑蓝法验证MCF-7C细胞的耐药性、解毒祛瘀方的细胞毒性以及对MCF-7C细胞他莫昔芬耐药性的影响。利用流式细胞术检测细胞凋亡率。利用蛋白质印迹法检测各组MCF-7C细胞中PI3K/Akt/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白的表达。结果 MCF-7C细胞对他莫昔芬的耐药指数为7.20；而经解毒祛瘀方（2.5 g/L）协同作用后，MCF-7C细胞对他莫昔芬的耐药指数为2.02。他莫昔芬+解毒祛瘀方组MCF-7C细胞凋亡率明显高于他莫昔芬组［（56.72±7.25）%比（13.24±0.76）%］，同时p-PI3K［（0.37±0.06）比（0.68±0.07）］、p-Akt［（0.17±0.02）比（0.51±0.05）］、p-mTOR［（0.10±0.02）比（0.39±0.02）］蛋白表达量也明显低于他莫昔芬组（均P＜0.05）。而加入PI2K/Akt通路激活剂IGF-1后，IGF-1+他莫昔芬+解毒祛瘀方组MCF-7C细胞增殖抑制率和凋亡率较他莫昔芬+解毒祛瘀方组均明显降低（均P＜0.05）。结论 解毒祛瘀方可逆转乳腺癌细胞他莫昔芬的耐药性，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路活化有关。

目的 探讨依托咪酯（ETO）对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和凋亡的影响及含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2（WWP2）在其中发挥的作用机制。方法 分别采用0、1、2和3 mg/L的ETO处理人正常肺上皮细胞系BESA-2B和人NSCLC细胞系A549，细胞计数试剂盒法检测细胞活力；将A549细胞随机分为对照组、ETO（3 mg/L）组、ETO+NC组和ETO+WWP2-OE组，后2组分别于ETO处理后转染空载体pcDNA3.1-NC或WWP2过表达载体pcDNA3.1-WWP2，集落形成试验检测细胞增殖能力；TUNEL染色检测细胞凋亡；实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中WWP2的mRNA表达；STITCH数据库选择与ETO直接相互作用的蛋白质；蛋白质印迹法检测各组细胞中WWP2、增殖、凋亡和磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白表达。结果 ETO以剂量依赖性方式显著降低A549细胞活力（F=147.923，P＜0.001）；而对正常肺上皮BESA-2B细胞活力无影响（F=1.427，P=0.126）。不同浓度（0、1、2、3 mg/L）ETO处理A549细胞后，集落形成数量逐渐减少［0、1、2、3 mg/L ETO组分别为（898±38）、（785±48）、（635±36）、（388±20）个］，细胞凋亡率逐渐升高［0、1、2、3 mg/L ETO组分别为（2.23±0.65）%、（7.63±0.35）%、（13.24±0.47）%、（18.93±0.36）%］，呈剂量依赖性（F=218.732、352.786，均P＜0.001）。STITCH数据库预测ETO可通过上调WWP2蛋白表达和下调PTEN蛋白表达与WWP2和PTEN相互作用。与对照组相比，ETO组细胞中WWP2的mRNA和蛋白表达降低，集落形成数量减少，细胞凋亡率升高，增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞增殖抗原Ki67、B淋巴细胞瘤基因2(Bcl-2)和PTEN蛋白表达降低，Bcl-2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)蛋白表达升高，磷酸化PI3K（p-PI3K）/PI3K和磷酸化Akt（p-Akt）/Akt比值降低（均P＜0.01）；与ETO+NC组比较，ETO+WWP2-OE组细胞中WWP2的mRNA和蛋白表达升高，集落形成数量增多，细胞凋亡率降低，PCNA、Ki67、Bcl-2和PTEN蛋白表达增多，Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达减少，p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高（均P＜0.01）。结论 ETO可抑制A549细胞增殖并促进细胞凋亡，其作用机制可能与调控WWP2的下调和PTEN/PI3K/Akt通路的激活有关。